Cell transfection
細(xì)胞誘導(dǎo)
轉(zhuǎn)染是使用非病毒感染的手段人工引入核酸（DNA或RNA）進(jìn)入細(xì)胞的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白，或特異性增強或抑制砸昏然細(xì)胞中的基因表達(dá)。
轉(zhuǎn)染的類型
瞬轉(zhuǎn)：
因為導(dǎo)入的核酸沒有整合到宿主細(xì)胞基因組，因此它只會短暫地存在于宿主細(xì)胞中，不會隨著細(xì)胞的分裂而進(jìn)入到子代細(xì)胞中。然而，導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)的高拷貝數(shù)導(dǎo)致其在細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)表達(dá)水平較高。
穩(wěn)轉(zhuǎn)：
外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為哦附加體質(zhì)粒保存在細(xì)胞中。與瞬時轉(zhuǎn)染不同，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染允許外源DNA在轉(zhuǎn)染的細(xì)胞及其后代中的長期維持。然而通常是將單拷貝或幾個拷貝的外源DNA整合到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的基因組中，因此，其表達(dá)水平一般低于瞬時轉(zhuǎn)染的表達(dá)水平。
瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)的比較：
| 瞬轉(zhuǎn) | 穩(wěn)賺 |
|---|---|
| 導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中，而是保留在細(xì)胞核上 | 導(dǎo)入的DNA整合到基因組中 |
| 導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代；遺傳改變只是暫時的 | 導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)能夠代代相傳；遺傳改變時永久的 |
| 不需要選擇性遺傳 | 需要選擇性篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞 |
| DNA載體和RNA都可用于瞬時轉(zhuǎn)染 | 只有DNA載體可用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染；RNA本身不能穩(wěn)定地導(dǎo)入細(xì)胞中 |
| 導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)的高拷貝數(shù)導(dǎo)致高水平的蛋白表達(dá) | 單拷貝數(shù)或低拷貝數(shù)的穩(wěn)定整合的DNA導(dǎo)致較低水平的蛋白質(zhì)表達(dá) |
| 通常在轉(zhuǎn)染后24-96小室內(nèi)收獲細(xì)胞 | 需要2-3周的時間篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞克隆 |
| 通常不適合使用具有誘導(dǎo)型啟動子的載體的研究 | 適用于使用帶有誘導(dǎo)型啟動子的載體的研究 |
服務(wù)價格
| 商品信息 | 貨號 | 單價 | 備注 |
|---|---|---|---|
| 誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染mimic/ inhibitor轉(zhuǎn)染 |
LLJ021 | 2000元/指標(biāo) | 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑 |
| 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 | LLJ013 | 2500元/指標(biāo) | 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑 |
| 轉(zhuǎn)染(siRNA/shRNA) | LLJ014 | 2000元/指標(biāo) | 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑,設(shè)三保一或者客戶提供已驗證的序列 |
| 轉(zhuǎn)染(miRNA) | LLJ015 | 2000元/指標(biāo) | 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑 |
| 慢/腺病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染 | LLJ016 | 3000元/指標(biāo) | 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑 |
| 慢病毒細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 | LLJ017 | 6000元/指標(biāo) | 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑。一株細(xì)胞做實驗通常會構(gòu)建2株(對照株NC，轉(zhuǎn)染株) |
| 細(xì)胞沉默/敲低效 率驗證樣本提供 |
LLJ018 | 840元/指標(biāo) | 細(xì)胞沉默需要"設(shè)三保一"即設(shè)計3條序列轉(zhuǎn)染細(xì)胞，PCR篩選最佳的一條序列進(jìn)行后續(xù)實驗，涉及沉默(或者敲低)的，需要額外報12例PCR提樣(對照組/序列1組/序列2組/序列3組，每組3重復(fù))+1個引物+檢測。注意:客戶提供確定序列的，不需要此項 |
| 細(xì)胞過表達(dá)效率 驗證樣本提取 |
LLJ019 | 420元/指標(biāo) | 過表達(dá)樣本分組過表達(dá)對照組，過表達(dá)組，魅族3重復(fù)，共計6例，進(jìn)行PCR檢測 |
實驗掠影
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